Mikroplastické vlákna boli nájdené hlboko v dolných častiach pľúc žijúcich ľudí takmer u všetkých ľudí zo vzorky v nedávnej britskej štúdii. Štúdia objavila mikroplastické častice prítomné v mnohých maskách COVID-19 v pľúcnom tkanive 11 z 13 pacientov, ktorí podstúpili operáciu.
Polypropylén (PP) a polyetyléntereftalát (PET) boli najčastejšími látkami prítomnými v pľúcach.
Podporte nás: Bez vašej pomoci by sme toto nedokázali.
Neziskový sektor: SLSP Názov účtu: Dôstojnosť Slovenska SK28 0900 0000 0051 7971 8989
Všetky práva vyhradené ® OZ Dôstojnosť Slovenska. Zdieľanie dovolené.
Mikroskopické plastové úlomky a vlákna objavili vedci z Hull York School of Medicine vo Veľkej Británii. Niektoré vlákna boli dlhé dva milimetre u pacientov podstupujúcich chirurgický zákrok, ktorým bola odobratá vzorka pľúcneho tkaniva.
Plastový prach a mikroskopické úlomky sú vyrobené z rovnakých plastov, aké sa používajú na výrobu všadeprítomných chirurgických masiek, ktoré nosia stovky miliónov ľudí na celom svete, ako to nariadili vlády v snahe zastaviť šírenie choroby. COVID-19.
Najčastejšie používaným materiálom na výrobu týchto masiek je PP. PP tkanina je vyrobená z "termoplastického" polyméru, čo znamená, že sa s ňou ľahko pracuje a tvaruje sa pri vysokých teplotách.
Modré chirurgické masky môžu byť tiež vyrobené z polystyrénu, polykarbonátu, polyetylénu alebo polyesteru, čo sú všetky typy tkanín odvodených z termoplastických polymérov.
Mikroplasty boli prvýkrát detegované v ľudskej krvi v marci, čo ukazuje, že častice môžu cestovať po celom ľudskom tele a môžu sa usadiť v orgánoch. Zdravotný dopad ešte nie je stanovený.
Výskumníci sa obávajú, že mikroplasty poškodzujú ľudské bunky v laboratóriu. V súlade s touto správou kanadské noviny Western Standard urobili rozhovor s Chrisom Shaeferom, inžinierom, ktorý pracuje pre niekoľko súkromných spoločností a zdravotnícku službu v Alberte a je uznávaným autorom v tejto oblasti. Tento typ masky definuje ako „dýchacie bariéry“ a nie ako chirurgické masky.
„To, čo bolo v nemocniciach a prostredníctvom širokej verejnosti nariadené prostredníctvom celej tejto agendy COVID-19, nie sú masky. Nespĺňajú zákonnú definíciu [masky],“ povedal Shaefer. „Správna maska má dýchacie otvory navrhnuté pred ústami a nosom, aby sa zabezpečilo ľahké a ľahké dýchanie. V tých, ktoré sa používajú, je dýchacia bariéra uzavretá cez ústa a nos. A pritom zachytáva oxid uhličitý, ktorý vydychujete, a núti vás ho vdychovať späť, čo spôsobuje zníženie hladiny vdychovaného kyslíka a vedie k prebytku oxidu uhličitého. Ich používanie teda nie je bezpečné.
- Aktualizované
Štúdia nachádza plasty nachádzajúce sa v maskách prítomných v pľúcach pacientov
Mikroplastické vlákna boli nájdené hlboko v dolných častiach pľúc živých ľudských bytostí takmer u každého človeka, z ktorého bola odobratá vzorka v nedávnej britskej štúdii.
Štúdia z Veľkej Británie objavila mikroplastické častice — prítomné v mnohých maskách COVID -19 — v pľúcnom tkanive 11 z 13 pacientov podstupujúcich operáciu.
Polypropylén (PP) a polyetyléntereftalát (PET) boli najrozšírenejšími látkami prítomnými v pľúcach.
"Vzdušné mikroplasty (MP) boli vzorkované na celom svete a je známe, že ich koncentrácia sa zvyšuje v oblastiach s vysokou ľudskou populáciou a vysokou aktivitou, najmä v interiéri. Hlásené boli aj respiračné symptómy a choroby po vystavení profesionálnej úrovni MP v priemyselných prostrediach,“ uvádza sa v britskej štúdii. „Celkovo bolo identifikovaných 39 MP v 11 z 13 vzoriek pľúcneho tkaniva... Tieto výsledky podporujú inhaláciu ako cestu expozície environmentálnych MP a táto charakterizácia typov a úrovní môže teraz poskytnúť realistické podmienky pre laboratórne expozičné experimenty s cieľom zisťovania zdravotných dopadov“.
„Neočakávali sme, že nájdeme najvyšší počet častíc v dolných oblastiach pľúc alebo častíc takých veľkostí, aké sme našli,“ povedala Laura Sadofsky z Hull York Medical School vo Veľkej Británii, vedúca autorka štúdie. "Je prekvapujúce, že dýchacie cesty sú menšie v dolných častiach pľúc a očakávali by sme, že častice týchto veľkostí budú odfiltrované alebo zachytené skôr, ako sa dostanú tak hlboko."
"Tieto údaje poskytujú dôležitý pokrok v oblasti znečistenia ovzdušia, mikroplastov a ľudského zdravia," povedala.
Pri výskume sa použili vzorky zdravého pľúcneho tkaniva z oblasti pľúc, ktoré boli určené na operáciu. Analyzoval častice s veľkosťou až 0,003 mm a použil spektroskopiu na identifikáciu typov plastov.
Použila tiež kontrolné vzorky na zohľadnenie úrovne kontaminácie pozadia. Štúdia bola prijatá na publikovanie v časopise Science of the Total Environment (3).
Staršia štúdia publikovaná v roku 2020 skúmala riziká spojené s nosením masky a vdychovaním mikroplastov. Štúdia dospela k záveru:
• Nosenie masiek predstavuje riziko vdýchnutia mikroplastov, opakované použitie masiek riziko zvyšuje
• Nosenie masiek N95 predstavuje z dlhodobého hľadiska najnižšie riziko vdýchnutia mikroplastov
• Nosenie masiek, okrem masky N95, predstavuje vyššie riziko vdýchnutia mikroplastov s pásikmi
• Nosenie masiek vedie z dlhodobého hľadiska k nižšiemu hrubému riziku vdýchnutia mikroplastov
„Chirurgické, bavlnené, módne masky a masky s aktívnym uhlím, ktoré sa nosí, predstavujú vyššie riziko vdýchnutia mikroplastov podobných vláknam, zatiaľ čo všetky masky vo všeobecnosti znižujú expozíciu, keď sa používajú pod predpokladanú dobu (< 4 hodiny),“ uvádza štúdia.
Chris Schaefer je špecialista na respirátory a odborník na školenia na mieste so sídlom v Edmontone, Alta. Už viac ako 20 rokov vyučuje a vykonáva testovanie priľnavosti respirátorov so svojou spoločnosťou SafeCom Training Services Inc. Medzi jeho klientov patria vládne rezorty, kanadská armáda, zdravotnícke služby v Alberte, vzdelávacie inštitúcie a súkromný priemysel. Schaefer je publikovaný autor a uznávaná autorita v oblasti respirátorov a masiek.
Western Standard sa spýtal Schaefera, či verí, že chirurgické masky typu používaného miliónmi Kanaďanov a ľudí na celom svete predstavujú značné riziko vdýchnutia mikroplastov zo samotných masiek. Začal tým, že objasnil, že pokrývka tváre všeobecne označovaná ako „maska“ v skutočnosti vôbec nie je maskou.
Schaefer označuje rúška na tvár COVID-19 ako „dýchacie bariéry“.
„To, čo bolo v nemocniciach a prostredníctvom širokej verejnosti nariadené prostredníctvom celej tejto agendy COVID-19, nie sú masky. Nespĺňajú zákonnú definíciu [masky," povedal Shaefer. „Správna maska má vytvorené dýchacie otvory pred ústami a nosom, aby sa zabezpečilo ľahké a ľahké dýchanie. Cez ústa aj nos je uzavretá dýchacia bariéra. A tým zachytí oxid uhličitý, ktorý vydýchate, núti vás ho znovu vdýchnuť, čo spôsobí zníženie hladiny vdychovaného kyslíka a spôsobí nadmerné množstvo oxidu uhličitého. Takže ich nosenie nie je bezpečné.“
Schaefer bol dôrazný, keď sa ho opýtali, či si myslí, že chirurgické masky, ktoré sa bežne používajú, vylučujú inhalované mikroplasty.
„Pokiaľ ide o to, či by to mohlo spôsobiť, že niekto vdýchne polypropylénové vlákna, ktoré sa používajú na výrobu tohto materiálu, a syntetické polyméry, ktoré sa používajú na filtráciu týchto zariadení – absolútne. Vezmite si nožnice a jednu rozstrihnite. Môžete vidieť, že medzi dvoma hlavnými obalmi, ktoré sú zapuzdrené, sa tieto voľné vlákna odlamujú. Uvoľňujú sa zo samotného krytu, len bežným opotrebovaním a nepokojom pri jeho nasadzovaní a vyzliekaní,“ povedal Schaefer.
Schaefer povedal, že si budeme musieť počkať, kým uvidíme dlhodobé účinky vdychovania mikroplastov z masiek.
„Takže vieme, že ľudia vdychujú vlákna. Aké budú riziká, aké budú účinky - môže to byť čokoľvek - ale určite to môže spôsobiť zápal pľúc a môže spôsobiť zápal celého tela. Absolútne,“ povedal Schaefer.
"Toto nie je normálne. Každý, kto by bol normálne vystavený akýmkoľvek typom syntetických polymérov alebo polypropylénových vlákien [v pracovnom prostredí], by musel nosiť schválenú ochranu dýchacích ciest. Tieto dýchacie bariéry nie sú respirátory. Tieto vlákna sa rozpadajú na 0,2 mm a veľké sú päť mm. Takže sú úplne vdýchnuteľné, rozpadajú sa veľmi malé a no, čo to urobí s ľuďmi vo forme funkcie pľúc – ako aj preťaženia toxicitou v ich tele – hádam sa dozvieme o pár rokov.
Hoci posledná štúdia hodnotila schopnosti masiek filtrovať prichádzajúce mikroplasty z prostredia, štúdia nehodnotila, či sa častice uvoľňujú z konštrukcie samotnej masky na jej alternatívnej strane – častice, ktoré by sa dostali do pľúc nositeľa. Amanda Brown je reportérka pre Western Standard
Plastový prach a mikroskopické úlomky sú vyrobené z rovnakých plastov, aké sa používajú na výrobu všadeprítomných tvárových masiek. Tie nosia stovky miliónov ľudí po celom svete. Ich vlády im nariadili, aby pomohli spomaliť šírenie COVID-19 – návrh, nad ktorým mnohí experti krútia hlavami, ako nezmyselný. Porovnania štatistík infekcií z krajín s požiadavkou na masku alebo bez nej tieto pochybnosti podčiarkujú.
PP, PET, polystyrén, polykarbonát, polyetylén, polyester...
Najbežnejším materiálom používaným na výrobu týchto masiek je PP. Táto tkanina je vyrobená z „termoplastického“ polyméru, ktorý sa ľahko spracováva a tvaruje pri vysokých teplotách. Modré chirurgické masky môžu byť tiež vyrobené z polystyrénu, polykarbonátu, polyetylénu alebo polyesteru, všetky druhy materiálov odvodených od termoplastických polymérov.
Plasty v potravinárskom priemysle sú veľmi problematické
Treba spomenúť, že plast je v potravinárskom priemysle vnímaný čoraz kritickejšie. Napríklad PET fľaše sa nesmú skladovať príliš dlho – a iba pri izbovej teplote. V opačnom prípade by sa karcinogénne zmäkčovadlá mohli vyplaviť do tekutín, ktoré obsahujú, a predstavovať vážne zdravotné riziko, najmä pri opakovanom požití. Plast z pleťových masiek je v tomto smere ešte otáznejší, keďže jeho zložky sa nielen „teoreticky“ prenášajú zo steny fľaše napríklad do minerálky. Plast sa hromadí priamo v tele a môže tam uvoľňovať najrôznejšie látky alebo dokonca spúšťať zápaly, alergie a problémy rôzneho druhu.
- PET – toxické látky môžu z PET migrovať do kvapalín v ňom uložených: chemikálie, environmentálne hormóny (látky podobné estrogénu).
- Polykarbonát – považovaný za škodlivý a nevhodný pre potraviny. Z tohto plastu sa uvoľňuje bisfenol A, ktorý pôsobí ako hormón a je zdraviu škodlivý.
- Polystyrén – vyvoláva osobitné obavy a je toxický a existuje podozrenie, že ovplyvňuje reprodukciu
- PP, polyetylén a polyester nie sú priamo nebezpečné, ale nie sú biologicky odbúrateľné. Tieto látky zostávajú v životnom prostredí obzvlášť dlho. Polyesterové častice v tele preto môžu z dlhodobého hľadiska spôsobovať rôzne problémy.
Plastové nanočastice sa dostávajú do krvi a orgánov
Problém je však oveľa horší: v marci ďalšia štúdia ukázala (1), že mikroplastové častice sa dokonca dostávajú do ľudskej krvi. Keď sa tam dostanú, môžu sa voľne pohybovať po tele a usadiť sa v orgánoch. Keďže plastové častice nepatria medzi cudzie telesá a patogény, proti ktorým si ľudský organizmus milióny rokov vytváral obranu, nemožno posúdiť dôsledky a nebezpečenstvo tohto vývoja.
Nezabudnite, že vlády tiež nútili svoje deti nosiť vysoko toxické a nebezpečné plastové masky počas dvoch rokov napriek tomu, že boli testované a zdravé. Ak by z tohto postupu vznikli následné škody ako pľúcne ochorenia alebo rakovina, všetci, ktorí opatrenia nariadili, nesú vážnu spoluúčasť na ublížení na zdraví z nedbanlivosti až po zabitie z nedbanlivosti.
Už z výskumu jemného prachu bolo známe, že častice plastov sa môžu dostať do tela cez pľúca.
Vzduchom prenášané mikroplasty (MP) boli celosvetovo skúmané a je známe, že ich koncentrácia sa zvyšuje v oblastiach s vysokou ľudskou populáciou a vysokou aktivitou, najmä v interiéroch. Hlásené boli aj respiračné symptómy a ochorenia po vystavení koncentráciám MP v priemyselných podmienkach. Celkovo bolo identifikovaných 39 MP v 11 z 13 vzoriek pľúcneho tkaniva... Tieto výsledky podporujú inhaláciu ako spôsob expozície environmentálnych MP. Toto určenie typov a množstiev môže teraz poskytnúť realistické podmienky pre laboratórne expozičné experimenty. Cieľom je určiť účinky na zdravie.
Western Standard Online
Neočakávalo sa, že najväčšia koncentrácia plastových častíc sa bude nachádzať v dolných oblastiach pľúc. Keďže sú tam dýchacie cesty menšie, človek by tam nečakal najmä veľké častice.
Obrázok nižšie ukazuje, z akého plastu boli nájdené častice vyrobené.
Staršie štúdie poskytovali nejasný obraz
Už v roku 2020 bola zverejnená štúdia, ktorá sa zaoberala vdychovaním mikroplastov cez korónové ochranné masky: COVID-19: Štúdia výkonnosti rizika vdýchnutia mikroplastov, ktoré predstavuje nosenie masiek:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7773316/
Toto dospelo k nasledujúcim záverom:
- Nosenie masiek nesie so sebou riziko vdýchnutia mikroplastov, opätovné použitie masiek riziko zvyšuje
- Nosenie masiek, s výnimkou N95, predstavuje vyššie riziko vdýchnutia pásikovitých mikroplastov
Pokiaľ ide o vdychovanie mikroplastov v prostredí, podľa vtedajšej štúdie by masky riziko o niečo znížili. Vždy by bolo dôležité, aby nebola prekročená stanovená doba nosenia kratšia ako štyri hodiny. Štúdia však hodnotila najmä filtráciu plastových častí prítomných v prostredí. Oddelenie častí masky a to, či sa dostanú do pľúc, sa neskúmalo.
Špecialista na ochranu dýchacích ciest rozoberá príbeh masky
Spoločnosť Western Standard viedla rozhovor s Chrisom Schaeferom (Viď úplne hore), špecialistom na ochranu dýchacích ciest a odborníkom na školenia so sídlom v Edmontone, Alta.
Jeho verdikt je zdrvujúci:
To, čo bolo v nemocniciach a širokej verejnosti nariadené prostredníctvom celej tejto agendy COVID-19, nie sú masky. Nespĺňajú zákonnú definíciu [masky]. [Správna] maska má vytvorené dýchacie otvory pred ústami a nosom, aby sa zabezpečilo ľahké a ľahké dýchanie. Cez ústa a nos je uzavretá ochranná dýchacia bariéra. Tým zachytí oxid uhličitý, ktorý vydýchate, a núti vás ho vdychovať späť, čo vedie k zníženiu hladiny vdychovaného kyslíka a nadmernej hladine oxidu uhličitého. Nie je teda bezpečné ich nosiť.
Rozhovor s Chrisom Schaeferom, reprodukovaný vo Western Standard Online
Ak máte po nasadení masky pocit cudzieho telesa, vdýchli ste vlákna
Schaefer sa drasticky vyjadril aj k nebezpečenstvu vdýchnutia mikroplastov a plastových vlákien cez takéto plastové masky: Takúto masku stačí rozstrihnúť nožnicami, aby ste videli, ako sa vlákna uvoľňujú a odlamujú. Je to spôsobené výrobou. Prvé odlepenia začínajú mechanickým namáhaním spôsobeným nasadzovaním alebo vyzliekaním.
Za posledné dva roky som veľa písal o nebezpečenstvách týchto dýchacích bariér, posledné dva roky som hovoril s vedcami [a ďalšími] ľuďmi o ľuďoch, ktorí dýchajú vlákna. Ak máte pocit, že po ich nosení máte trochu mačacích chlpov alebo akékoľvek podráždenie v krku. To znamená, že dýchate vlákna.
Schaefer vidí aj masívne riziko dlhodobých následkov: „Aké budú riziká, aké budú následky – môže to byť čokoľvek – ale určite to môže spôsobiť zápal pľúc a zápal celého tela. Absolútne."
To nie je normálne. Každý, kto by bol normálne vystavený syntetickým polymérom alebo polypropylénovým vláknam [v pracovnom prostredí], by musel nosiť schválenú ochranu dýchacích ciest. Tieto dýchacie bariéry nie sú respirátory. Tieto vlákna sa rozpadajú na častice v rozsahu 0,2 mm, veľké 5 mm. Sú teda úplne vdýchnuteľné, rozpadajú sa veľmi malé. Čo to urobí s ľuďmi z hľadiska funkcie pľúc a preťaženia ich tela toxicitou, sa dozvieme o pár rokov.
(1) Mikroplasty sa prvýkrát našli v ľudskej krvi
Exkluzívne: Objav ukazuje, že častice môžu cestovať po tele a môžu sa usadiť v orgánoch
Mikroplastické znečistenie bolo prvýkrát zistené v ľudskej krvi, pričom vedci našli drobné častice u takmer 80 % testovaných ľudí.
Objav ukazuje, že častice môžu cestovať po tele a môžu sa usadiť v orgánoch. Vplyv na zdravie je zatiaľ neznámy. Výskumníci sú však znepokojení, pretože mikroplasty spôsobujú poškodenie ľudských buniek v laboratóriu a je už známe, že častice znečistenia ovzdušia vstupujú do tela a spôsobujú milióny predčasných úmrtí ročne.
Vedci analyzovali vzorky krvi od 22 anonymných darcov, všetkých zdravých dospelých, a u 17 našli plastové častice. Polovica vzoriek obsahovala PET plast, ktorý sa bežne používa vo fľašiach od nápojov, a tretina polystyrénu, ktorý sa používa na balenie potravín a iných produktov. Štvrtina vzoriek krvi obsahovala polyetylén, z ktorého sú vyrobené plastové tašky.
„Naša štúdia je prvým náznakom, že máme v krvi častice polyméru – je to prelomový výsledok,“ povedal profesor Dick Vethaak, ekotoxikológ z Vrije Universiteit Amsterdam v Holandsku. "Musíme však rozšíriť výskum a zvýšiť veľkosť vzoriek, počet hodnotených polymérov atď." Ďalšie štúdie viacerých skupín už prebiehajú, povedal.
„Určite je rozumné mať obavy,“ povedal Vethaak pre Guardian. "Častice sú tam a sú transportované po celom tele." Povedal, že predchádzajúce práce ukázali, že mikroplasty sú 10-krát viac vo výkaloch detí v porovnaní s dospelými a že deti kŕmené plastovými fľašami prehĺtajú milióny mikroplastových častíc denne.
„Vo všeobecnosti tiež vieme, že bábätká a malé deti sú zraniteľnejšie voči chemikáliám a časticiam,“ povedal. "To ma veľmi znepokojuje."
Nový výskum je publikovaný v časopise Environment International a prispôsobil existujúce techniky na detekciu a analýzu častíc s veľkosťou len 0,0007 mm. Niektoré vzorky krvi obsahovali dva alebo tri druhy plastov. Tím použil oceľové injekčné ihly a sklenené skúmavky, aby sa zabránilo kontaminácii, a testoval hladiny mikroplastov na pozadí pomocou slepých vzoriek.
"Veľkou otázkou je, čo sa deje v našom tele?" povedal Vethaak. „Sú častice zadržané v tele? Sú transportované do určitých orgánov, ako napríklad prekonanie hematoencefalickej bariéry? A sú tieto hladiny dostatočne vysoké na to, aby vyvolali ochorenie? Naliehavo potrebujeme financovať ďalší výskum, aby sme to mohli zistiť.“
Nový výskum financovala holandská národná organizácia pre výskum a vývoj v oblasti zdravia a Common Seas, sociálny podnik pracujúci na znížení plastového znečistenia.
„Produkcia plastov sa do roku 2040 zdvojnásobí,“ povedala Jo Royle, zakladateľka charitatívnej organizácie Common Seas. "Máme právo vedieť, čo všetko tento plast robí s našimi telami." Common Seas spolu s viac ako 80 mimovládnymi organizáciami, vedcami a poslancami žiada vládu Spojeného kráľovstva, aby vyčlenila 15 miliónov libier na výskum vplyvu plastov na ľudské zdravie. EÚ už financuje výskum vplyvu mikroplastov na plody a bábätká a na imunitný systém .
Nedávna štúdia zistila, že mikroplasty sa môžu prichytiť na vonkajšie membrány červených krviniek a môžu obmedziť ich schopnosť transportovať kyslík. Častice sa našli aj v placentách tehotných žien a u gravidných potkanov rýchlo prechádzajú cez pľúca do srdca, mozgu a iných orgánov plodu.
Nový prehľadový dokument publikovaný v utorok , ktorého spoluautorom je Vethaak, zhodnotil riziko rakoviny a dospel k záveru: „Podrobnejší výskum o tom, ako mikro- a nanoplasty ovplyvňujú štruktúry a procesy ľudského tela a či a ako dokážu transformovať bunky a vyvolať karcinogenézu, je naliehavo potrebné, najmä vzhľadom na exponenciálny nárast výroby plastov. Problém je každým dňom naliehavejší."
Zdroj: theguardian.com
(3) Detekcia mikroplastov v ľudskom pľúcnom tkanive pomocou μFTIR spektroskopie
Prijaté 23. decembra 2021, Revidované 25. marca 2022, Prijaté 25. marca 2022, Dostupné online 29. marca 2022, Verzia záznamu 6. apríla 2022 .
Zvýraznenie
- •Mikroplasty boli identifikované vo všetkých oblastiach ľudských pľúc pomocou analýzy μFTIR.
- •Najviac zastúpené boli polypropylénové a polyetyléntereftalátové vlákna.
- •Výsledky podporujú inhaláciu ako spôsob expozície MP.
Abstraktné
Vzduchom prenášané mikroplasty (MP) boli vzorkované na celom svete a je známe, že ich koncentrácia sa zvyšuje v oblastiach s vysokou ľudskou populáciou a vysokou aktivitou, najmä v interiéri. Hlásené boli aj respiračné symptómy a choroby po vystavení pracovným úrovniam MP v priemyselnom prostredí. Zostáva zistiť, či sa MP z prostredia môžu vdychovať, ukladať a akumulovať v ľudských pľúcach. Táto štúdia analyzovala vzorky štiepeného ľudského pľúcneho tkaniva (n = 13) pomocou μFTIR spektroskopie (obmedzenie veľkosti 3 μm) na detekciu a charakterizáciu akýchkoľvek prítomných MP. Celkovo bolo v 11 z 13 vzoriek pľúcneho tkaniva identifikovaných 39 MPs s priemerom 1,42 ± 1,50 MP/g tkaniva (vyjadrené ako 0,69 ± 0,84 MP/g po odčítaní pozadiaúpravy). Hladiny MP vo vzorkách tkaniva boli významne vyššie ako hladiny identifikované v kombinovaných procedurálnych/laboratórnych slepých pokusoch (n = 9 MP, s priemerom ± SD 0,53 ± 1,07, p = 0,001). Zo zistených MP bolo identifikovaných 12 typov polymérov s najrozšírenejším polypropylénom , PP (23 %), polyetyléntereftalátom , PET (18 %) a živicou (15 %). MP (neupravené) boli identifikované vo všetkých oblastiach pľúc kategorizovaných ako horné (0,80 ± 0,96 MP/g), stredné/lingulárne (0,41 ± 0,37 MP/g) a s výrazne vyššími hladinami zistenými v dolnej časti (3,12 ± 1,30 MP /g) oblasť v porovnaní s hornou ( p = 0,026) a strednou ( p= 0,038) oblastí pľúc. Po odčítaní slepých pokusov sa tieto hladiny stali 0,23 ± 0,28, 0,33 ± 0,37 a 1,65 ± 0,88 MP/g. Štúdia demonštruje najvyššiu úroveň kontroly kontaminácie a uvádza neupravené hodnoty spolu s rôznymi technikami úpravy kontaminácie. Tieto výsledky podporujú inhaláciu ako spôsob expozície environmentálnych MP a táto charakterizácia typov a úrovní môže teraz poskytnúť realistické podmienky pre experimenty s laboratórnou expozíciou s cieľom určiť vplyvy na zdravie.
Grafický abstrakt
Skratky
Kľúčové slová
1 . Úvod
Mikroplasty (MP), tu definované ako plastové častice medzi 1 μm a 5 mm ( Hartmann et al., 2019 ), sú prítomné vo všetkých kompartmentoch životného prostredia; od morských a sladkovodných útvarov ( GESAMP, 2015 ), po pôdu ( Wang a kol., 2019 ), potraviny, pitnú vodu ( Danopoulos a kol., 2020a ; Danopoulos a kol., 2020b ) a vzduch ( Allen a kol., 2019 ; Dris a kol., 2017 ; Cai a kol., 2017 ; Jenner a kol., 2021 ). V druhom prípade boli suspendované častice MP izolované z mnohých atmosférických miest vrátane urbanizovaných centier miest ( Cai a kol., 2017 ; Wright a kol., 2019a ;Liu a kol., 2019a ), vnútorné domácnosti ( Dris a kol., 2017 ; Jenner a kol., 2021 ; Vianello a kol., 2019 ; Zhang a kol., 2020 ) a vzdialené vonkajšie regióny ( Allen a kol., 2019 ). Predchádzajúca práca zdôrazňuje, že občania sú vystavení vyšším koncentráciám MP vo svojich domovoch ( Jenner a kol., 2021 ) alebo vonkajších oblastiach s vysokou ľudskou aktivitou ( Jenner a kol., 2022 ), čo vedie k všadeprítomnej a nevyhnutnej expozícii ľudí ( Prata a kol., 2020 ). V dôsledku toho narastajú obavy týkajúce sa nebezpečenstva spojeného s požitím MP, dermálnym kontaktom a vdýchnutím ( Prata et al., 2020 ).
Syntetické vlákna boli predtým pozorované vo vzorkách ľudského pľúcneho tkaniva ( Pauly a kol., 1998 ), avšak obmedzené štúdie potvrdzujú prítomnosť MP v pľúcach spolu s nástrojmi chemickej analýzy, ako je μRaman a μFTIR spektroskopia ( Amato-Lourenço et al., 2021 ). Spoliehanie sa na samotné pozorovacie kritériá pri rozlišovaní medzi MP a non-MP môže viesť k nadhodnotenému a podhodnotenému počtu MP a nedostatku informácií týkajúcich sa typu polyméru alebo aditíva ( Eriksen a kol., 2013 ; Hidalgo-Ruz a kol. , 2012 ). Bola zdôraznená vierohodnosť MP inhalácie ( Prata, 2018 ; Wright a Kelly, 2017) a MP so šírkou len 5 μm boli hlásené vo vzorkách vzduchu ( Wright a kol., 2019a ; Li a kol., 2020 ). Po uvoľnení do životného prostredia sú plasty vystavené oxidácii, mechanickému namáhaniu a biologickému pôsobeniu, čo vedie k krehnutiu a fragmentácii, vytváraniu MP a prípadne nanoplastov (NP) (<1 μm), ako aj k uvoľňovaniu do životného prostredia vo svojej primárnej forme ( Hidalgo -Ruz a kol., 2012 ).
Historické štúdie uvádzajú respiračné symptómy a choroby na úrovni profesionálnej expozície u pracovníkov so syntetickým textilom, kŕdľami a pracovníkmi s vinylchloridom ( Prata, 2018 ) a ako také podporujú inhaláciu ako spôsob expozície MP. Zostáva však nejasné, či MP môžu vstúpiť a zostať v pľúcach bežnej populácie kvôli expozícii životného prostredia, a nie chronickým úrovniam pozorovaným v priemyselných prostrediach. MP sú navrhnuté tak, aby boli robustnými materiálmi, u ktorých je nepravdepodobné, že sa rozložia v pľúcach ( Law et al., 1990 ), čo môže viesť k akumulácii v priebehu času v závislosti od aerodynamického priemeru a respiračnej ochrany ( Prata, 2018 ).
Rastúce obavy súvisiace s MP vo vzduchu pramenia z neznámych typov polymérov, úrovní expozície a následkov ich vdýchnutia. Charakteristiky MP, ako je veľkosť, tvar, vektorované absorbované znečisťujúce látky a patogény, ako aj vylúhovanie plastového monoméru alebo aditíva, boli zdôraznené ako potenciálne promótory cytotoxicity ( Wright a Kelly, 2017 ). MP sú dôsledne identifikované vo vzorkách vzduchu, ich koncentrácia je najvyššia v interiéri ( Dris et al., 2017 ; Vianello et al., 2019 ; Zhang et al., 2020 ) a vo vysoko obývaných oblastiach ( Cai et al., 2017 ). sú ľahko pozastavené v čase vysokej ľudskej aktivity ( Zhang et al., 2020) a sú často malé a vláknité ( Liu et al., 2019a ). Spoločne tieto obavy zdôrazňujú potrebu presnej analýzy tkaniva, aby sme pochopili potenciál týchto syntetických polymérov preniknúť do ľudského dýchacieho systému a spôsobiť poškodenie.
Cieľom tejto štúdie je identifikovať akékoľvek MP častice prítomné vo vzorkách štiepeného ľudského pľúcneho tkaniva, pričom sa zohľadňuje aj procedurálna a laboratórna slepá kontaminácia. Akékoľvek častice izolované z pľúcneho tkaniva boli chemicky charakterizované pomocou μFTIR spektroskopie (s 3 μm dolným limitom veľkosti detekcie).
2 . materiál a metódy
2.1 . Získavanie ľudského tkaniva
Nadbytočné ľudské pľúcne tkanivo bolo odobraté z hrudných chirurgických zákrokov v Castle Hill Hospital, Hull University Teaching Hospitals NHS Trust, po schválení NHS Research Ethic Committee a Health Research Authority (REC reference 12/SC/0474). Vzorky periférneho ľudského pľúcneho tkaniva boli odobraté zo vzoriek z horného, stredného (ľavá lingula) alebo dolného laloka po chirurgickej resekcii rakoviny alebo chirurgickej redukcie objemu pľúc. Opis pôvodu tkaniva poskytol chirurgický tím. Pozornosť sa venovala tomu, aby sa vyhli okrajom nádoru. Podrobnosti o stave fajčenia darcov, povolaní a oblasti bydliska neboli pre výskumníkov k dispozícii na základe podmienok získaného etického súhlasu. Vzorky tkaniva sa umiestnili do prázdnych sklenených nádob s fóliovými viečkami a okamžite sa zmrazili (-80 ° C), kým sa nevykonala objemová analýza (dve šarže). Pľúcne tkanivo sa získalo od 11 pacientov (očíslovaných 1,1 až 11,1), pričom pacienti 1 a 2 poskytli dve vzorky (očíslované 1,2 a 2,2) z rôznych polôh pľúc (n = 13, celková hmotnosť tkaniva = 55,41 g), čo viedlo k priemernej hmotnosti 4,26 ± 3,87 g (rozsah 0,79–13,33 g). Priemerný vek pacientov bol 63 ± 13 rokov (rozsah 32–77), 5 žien a 6 mužov (Tabuľka 1 ).
Tabuľka 1 . Informácie o vzorke pacienta a tkaniva spolu s počtom MP identifikovaných vo vzorkách pomocou μFTIR spektroskopie . Zahrnuté sú typy polymérov a charakteristiky častíc a tri rôzne úpravy kontaminácie na zobrazenie výsledkov v jednotkách MP/g tkaniva. skratky; PAN = polyakrylonitril, PE = polyetylén , PES = polyester, PET = polyetyléntereftalát , PMMA = polymetylmetakrylát, PP = polypropylén , PS = polystyrén , PTFE = polytetrafluóretylén , PUR = polyuretán, Živica = alkyd/epoxid/uhľovodík, SEBS-etylén = styrén -butylénový kopolymér, TPE = termoplastický elastomér. R = pravé pľúca, L = ľavé pľúca, Nízka = spodná oblasť pľúc, stredná = stredná/lingulárna oblasť pľúc, hore = horná oblasť pľúc.
ID | Sex | Oblasť pľúc | Tkanivo (g) | MP celkom | MP polymér | Dĺžka, šírka (μm) | Tvar | MP / g a | MP / g b | MP/g c |
---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
1.1 | M | R, nízka | 2.02 | 8 | PET | 88, 10 | Vláknina | 3.96 | 2.97 | 1,94 len na základe PP |
PP | 55, 28 | Fragment | ||||||||
PP | 39,18 | Fragment | ||||||||
PP | 420, 9 | Vláknina | ||||||||
PP | 27, 10 | Fragment | ||||||||
PS | 89, 71 | Fragment | ||||||||
PTFE | 100, 29 | Vláknina | ||||||||
PTFE | 92, 88 | Film | ||||||||
1.2 | R, hore | 0.79 | 2 | PP | 109, 18 | Vláknina | 2.53 | 0.00 | ||
TPE | 66, 19 | Vláknina | ||||||||
2.1 | M | R, nízka | 0.80 | 3 | PP | 40, 22 | Fragment | 3.75 | 1.25 | |
PP | 144, 65 | Fragment | ||||||||
PTFE | 26, 20 | Fragment | ||||||||
2.2 | L, nízka | 0.84 | 3 | PS | 14, 14 | Fragment | 3.57 | 1.19 | ||
PTFE | 96, 5 | Vláknina | ||||||||
Živica | 19, 13 | Fragment | ||||||||
3.1 | M | R, hore | 13.33 | 5 | ON | 224, 9 | Vláknina | 0.38 | 0.23 | |
ON | 29, 17 | Fragment | ||||||||
PET PP |
202, 6 101, 17 |
Vláknina Vláknina |
||||||||
SEBS | 83, 18 | Film | ||||||||
4.1 | M | R, hore | 1.53 | 2 | PS | 60, 44 | Fragment | 1.31 | 0.65 | |
Živica | 12, 9 | Fragment | ||||||||
5.1 | F | L, bielizeň | 1.37 | 0 | žiadny | žiadny | 0.00 | 0.00 | ||
6.1 | M | R, stred | 3.98 | 2 | ON | 17, 10 | Fragment | 0.50 | 0.25 | |
Živica | 20, 15 | Fragment | ||||||||
7.1 | F | R, hore | 8.29 | 1 | PES | 40, 22 | Fragment | 0.12 | 0.00 | |
8.1 | F | L, nízka | 5.90 | 7 | PAN | 1112, 9 | Vláknina | 1.19 | 1.19 | |
ON | 28, 20 | Fragment | ||||||||
PET | 443, 13 | Vláknina | ||||||||
PET | 452, 12 | Vláknina | ||||||||
PP | 160, 46 | Fragment | ||||||||
Živica | 101, 9 | Vláknina | ||||||||
Živica | 261, 22 | Vláknina | ||||||||
9.1 | M | R, stred | 6.84 | 5 | PET | 897, 10 | Vláknina | 0.73 | 0.73 | |
PET | 2475, 12 | Vláknina | ||||||||
PMMA | 96, 76 | Fragment | ||||||||
AJ KEĎ | 155, 16 | Vláknina | ||||||||
Živica | 14, 4 | Vláknina | ||||||||
10.1 | F | R, hore | 2.12 | 1 | PET | 275, 12 | Vláknina | 0.47 | 0.47 | |
11.1 | F | R, hore | 7.60 | 0 | žiadny | žiadny | 0.00 | 0.00 | ||
Priemer ± SD | 1.42 ± 1.5 | 0.69 ± 0.84 |
- a) Celkový počet zistených poslancov bez zohľadnenia poslancov nájdených pri kontrolách.
- b) Celkové MP vo vzorke mínus celkové MP identifikované v kontrolách (bez ohľadu na typ polyméru) (doplnkové informácie).
- c) Úrovne kontaminácie MP po metóde LoD/LoQ ( Cowger et al., 2020 ), ak spĺňajú prah (doplnkové informácie).
2.2 . Trávenie a filtrácia pľúcneho tkaniva
Rozmrazené vzorky sa vystavili kúpeľu s peroxidom vodíka (100 ml 30% H202 ) a opláchli sa spolu s „procedurálnymi slepými pokusmi “ (n = 4) (doplnkový obrázok S1). Každá vzorka tkaniva sa preniesla do čistej sklenenej kónickej banky s fóliovým krytom a pridalo sa 100 ml 30 % H202 . Celková hmotnosť každej jednotlivej vzorky tkaniva natrávená je podrobne uvedená v tabuľke 1 . Banky sa umiestnili do trepacieho inkubátora pri 55 °C na približne 11 dní, 65 otáčok za minútu, alebo kým nebolo viditeľné žiadne tkanivo. Po 5 dňoch v inkubátore sa pridalo ďalších 100 ml 30 % H202 . Digest, upravený z predchádzajúcich štúdií skúmajúcich MP v rôznych environmentálnych a tkanivových vzorkách (Munno et al., 2018 ), zabezpečuje odstránenie organických častíc pri zachovaní integrity MP ( Allen et al., 2019 ; Munno et al., 2018 ). Vzorky sa potom prefiltrovali na filtre oxidu hlinitého (0,02 μm Anodisc, Watford, UK) pomocou skleneného vákuového filtračného systému. Tieto boli uložené v čistých sklenených Petriho miskách v tme pred analýzou chemického zloženia spolu s laboratórnymi slepými vzorkami (n = 13) (doplnkový obrázok S1).
2.3 . Chemická charakterizácia častíc pomocou μFTIR analýzy
Každá vzorka tkaniva Anodisc filter bola umiestnená priamo na spektroskopickú platformu μFTIR a dĺžka (najväčšia strana) a šírka (druhá najväčšia strana) boli zaznamenané pomocou nástroja na výber výšky, šírky a uhla veľkosti otvoru, ktorý je k dispozícii v rámci mikroskopie ThermoScientific Omnic Picta Nicolet iN10. softvér. Častice sa potom priradili ku kategórii tvaru (vlákno, film, fragment, pena alebo guľa ( Free a kol., 2014 )), pričom vláknité častice boli charakterizované ako častice s pomerom dĺžky k šírke > 3 ( Vianello a kol., 2019 ).
Spektroskopická analýza μFTIR sa uskutočnila v režime prenosu chladeného kvapalným dusíkom (Nicolet iN10, ThermoFisher, Waltham MA, USA), bez pomoci ďalšieho príslušenstva alebo kryštálov. Chladený detektor teluridu kadmia ortuťového (MCT) umožnil analýzu častíc s presnosťou až do veľkosti 3 μm. Použitý mikroskop Nicolet iN10 je vybavený 15 × 0,7 NA vysoko účinným objektívom a kondenzorom. Má namontovanú farebnú CCD digitálnu videokameru s nezávislým odrazovým a transmisným osvetlením na zachytávanie snímok častíc. Tento model má štandardizované 123× zväčšenie s použitým nastavením clony. Žiadne pozorovacie kritériá ( Hidalgo-Ruz et al., 2012) sa použil na výber špecifických častíc na analýzu μFTIR, aby sa zabránilo skresleniu. Pomocou nástroja na výber veľkosti otvoru boli do procesu analýzy zahrnuté všetky častice na vzorkovom filtri > 3 μm. Pre túto štúdiu sa analyzoval celý filter, ktorý obsahuje celkovú vzorku natráveného tkaniva.
Najprv sa zaznamenalo referenčné spektrum pozadia s použitím rovnakých parametrov ako častice, ktoré sa podrobili analýze. Prázdna oblasť filtra Anodisc bola vybraná ako miesto pre zber pozadia pred okamžitou analýzou častíc vzorky. μFTIR parametre boli; spektrálny rozsah 4000–1250 cm- 1 , vysoké spektrálne rozlíšenie 8 cm - 1, číslo skenovania 64. Nepokúsili sa žiadne vyhladenie, korekcia základnej línie ani transformácia údajov. Výsledné spektrá vzoriek sa porovnali s kombináciou knižníc polymérov (Omnic Picta, Omnic Polymer Libraries), ktoré sú dostupné so softvérom Omnic Picta, a použili sa celé spektrálne rozsahy s prahom zhody ≥70 %. Ak boli častice pod prahom indexu zhody ≥ 70 %, urobili sa tri pokusy na získanie úspešnej zhody pred prechodom k ďalšej častici, ktorá sa podrobuje analýze. Častice pod ≥ 70 % sa zhodujú a častice neklasifikované ako plast boli zaznamenané, ale neboli zahrnuté do prezentovaných výsledkov ( Cowger et al., 2020 ).
Počas analýzy μFTIR sa vedľa každého vzorkového filtra otvoril jeden „laboratórny slepý“ filter Anodisc (doplnkový obrázok S1). Celkovo sa analyzovalo 13 vzoriek pľúcneho tkaniva plus 4 „procedurálne slepé vzorky“ a 13 „laboratórne slepé vzorky“. Celkový počet identifikovaných častíc (MP a iné) bol 296, pričom 225 (76 %) z nich bolo nad hranicou 70 % dosiahnutého indexu kvality. Vo výsledkoch sú uvedené len údaje poslancov. Identifikované častice PET a PES MP boli v rámci tejto štúdie hlásené oddelene s použitím vysokej zhody (> 70 %) pri vyhľadávaní v databáze polymérov na potvrdenie ich identity.
2.4 . Opatrenia na zabezpečenie kvality a kontroly na zníženie a kvantifikáciu kontaminácie MP pozadia
Dodržiavali sa prísne kontrolné opatrenia, aby sa kvantifikovala a charakterizovala povaha akejkoľvek nevyhnutnej kontaminácie pozadia. Vzhľadom na všadeprítomnú povahu MP vo vzduchu by mohla byť kontaminácia na povrchu vzoriek pľúcneho tkaniva možná počas chirurgického zákroku, pri ktorom sa pľúcne tkanivo odoberalo živým ľudským subjektom. Aj keď nebolo možné úplne kontrolovať chirurgické prostredie, každá vzorka tkaniva bola nakvapkaná do 100 ml 30 % H202 kúpeľa , znovu uzavretá fóliou a miešaná počas 2 minút . Paralelne sa začali „procedurálne slepé pokusy“ (n = 4). Vzorka tkaniva sa odobrala a vonkajší povrch sa dôkladne opláchol 100 ml 30 % H202na odstránenie akejkoľvek povrchovej kontaminácie použitím metódy podobnej extrakcii mikroplastov z celej bioty ( Brander et al., 2020 ). Zvažovala sa analýza výlučne vnútornej časti tkaniva ( Pauly et al., 1998 ), ale nebola aplikovaná s cieľom zachovať väčšiu hmotu tkaniva. Vzorky tkaniva boli štiepené v dvoch dávkach, s dvoma procedurálnymi slepými vzorkami, ktoré napodobňovali celé kroky spracovania tkaniva, ale chýbala im vzorka pľúcneho tkaniva, spolu s každou dávkou (doplnkový obrázok S1). Činidlá boli filtrované a pripravené hromadne pre každú dávku. Pri vykonávaní analýz μFTIR sa „laboratórny slepý“ filter (n = 13), umiestnený v sklenenej utesnenej Petriho miske, otvoril na rovnakú dobu ako pri vzorke tkaniva.
MP nachádzajúce sa v „procedurálnych slepých pokusoch“ predstavujú kontamináciu z laboratórnych činidiel, zariadení alebo spad zo vzduchu počas prenosu vzoriek. Pre každú dávku sa vypočítala priemerná procedurálna kontaminácia a predpokladalo sa, že je prítomná v každej zo vzoriek tkaniva. MP v rámci „laboratórnych slepých vzoriek“ predstavujú kontamináciu z atmosférického spadu v laboratórnej miestnosti μFTIR počas charakterizácie častíc. Procedurálne slepé a laboratórne slepé výsledky sa spojili, aby sa zohľadnila kontaminácia v každom kroku. V súčasnosti nie sú v oblasti výskumu MP prijaté žiadne štandardizované protokoly, ktoré by zohľadňovali kontamináciu pozadia, takže v tejto štúdii sa na porovnanie použili viaceré úpravy kontaminácie. Zahŕňali dva prístupy: odčítanie, ktorá sa rutinne používa v oblasti výskumu MP, a technika limitu detekcie (LOD) a limitu kvantifikácie (LOQ) ( Horton et al., 2021 ) (doplnkové metódy S1). Prezentácia nespracovaných údajov, odčítania a výsledkov upravených LOD/LOQ umožňuje porovnanie pre každú techniku.
Všetka použitá voda H202 a MilliQ boli trikrát prefiltrované pomocou celosklenenej vákuovej filtračnej súpravy a 47 mm filtrov zo sklenených vlákien triedy 6 (GE Healthcare Life Sciences, Marlborough MA, USA). Všetky sklenené predmetyprešiel dôkladným ručným čistením, pred cyklom umývačky riadu s použitím destilovanej vody a potom ručným trojoplachovým umytím trikrát filtrovanou vodou MilliQ. Všetko vybavenie a reagencie boli vždy zakryté fóliovými viečkami a pri nalievaní bol vytvorený malý otvor. Okrem toho sa pri filtrovaní natrávených vzoriek sklo a steny filtračnej súpravy trikrát opláchli trikrát prefiltrovanou vodou MilliQ, aby sa predišlo strate častíc vzorky. Všetky práce sa vykonávali v dôkladne vyčistenej digestore s vypnutým napájaním a štítom, aby sa minimalizoval prietok nefiltrovaného vzduchu ( Wesch a kol., 2017 ) a suspenzia častíc ( Wright a kol., 2019b). Každá vzorka tkaniva bola spracovaná individuálne, aby sa zabránilo krížovej kontaminácii. Pre každý krok spracovania vzorky sa nepoužívalo plastové vybavenie, použili sa sklenené Petriho misky, bavlnený laboratórny plášť a nová sada nitrilových rukavíc. Príprava tkaniva a analýza častíc sa uskutočňovali v časoch nízkej aktivity, bez vetrania miestnosti a μFTIR sa uskutočňovali v miestnosti pre jednu osobu bez okien. Nakoniec prácu na štandardizácii vykonal jeden výskumník. Aby sa zabezpečilo, že žiadne častice nekontaminujú filtre Anodisc z výrobného procesu použitých diskov, vybrali sa tri náhodné filtre a pozorovali sa pod μFTIR, v ktorých neboli prítomné žiadne častice.
2.5 . Štatistická analýza
Testy na homogenitu a významnosť sa uskutočnili na neupravených hodnotách MP pomocou SPSS. Všetky údaje sa určili, že nie sú normálne rozdelené pomocou Shapiro-Wilkovho testu a aplikoval sa buď Kruskal-Wallis alebo Mann-Whitney U test.
3 . Výsledky
3.1 . Úrovne množstva MP zistené vo vzorkách ľudského pľúcneho tkaniva
Celkovo bolo identifikovaných 39 MP v 11 z 13 vzoriek ľudského pľúcneho tkaniva. Vo vzorkách ľudského pľúcneho tkaniva bol identifikovaný celkový neupravený priemer 3,00 ± 2,55 MPs na vzorku (rozsah 0–8 MP), čo sú výrazne vyššie hladiny ( p = 0,001) v porovnaní s 0,53 ± 1,07 MP na vzorku zistenú v kombinovaných slepých pokusoch. Keď sa vezme do úvahy hmotnosť vzorky tkaniva, bez zohľadnenia kontaminácie pozadia, bola zistená priemerná hodnota 1,42 ± 1,50 MP/g ( tabuľka 1 ). Po odčítaní kontaminácie pozadia sa táto hodnota stane 0,69 ± 0,84 MP/g ( Tabuľka 1). Neupravený priemer 2,09 ± 1,54 MP/g tkaniva bol identifikovaný u mužov (n = 6) a 0,36 ± 0,50 MP/g tkaniva u žien (n = 5) vzoriek (upravený na 0,91 ± 0,95 MP/ga 0,33 ± 0,52 MP/g po odčítaní kontaminácie pozadia). Všetky mužské vzorky obsahovali aspoň jednu MP časticu, zatiaľ čo dve z piatich ženských vzoriek nie. Údaje neboli normálne distribuované (p = 0,013) a Mann-Whitney U test odhalil, že vzorky tkaniva od mužských pacientov mali významne vyššie hladiny MP/g v porovnaní so ženami ( p = 0,019). Podrobný popis charakterizácie kontaminácie MP pozadia (procedurálne a laboratórne slepé vzorky) možno nájsť v doplňujúcich informáciách (tabuľka S1).
3.2 . Charakterizácia častíc MP zo vzoriek ľudského pľúcneho tkaniva
Vo vzorkách tkaniva bolo identifikovaných celkovo 12 typov polymérov, ako je podrobne uvedené na obr. 1A. PP (9, 23 %) a PET (7, 18 %) boli najhojnejšie ( obr. 1 A). Všetky MP identifikované vo vzorkách tkaniva boli vlákno (19, 49 %), fragment (17, 43 %) alebo film (3, 8 %) ( obr. 1 B, 2 ). Častice MP identifikované vo vzorkách tkaniva mali priemernú dĺžku častíc 223,10 ± 436,16 μm (rozsah 12–2475 μm) a strednú šírku častíc 22,21 ± 20,32 μm (rozsah 4–88 μm) ( obr. 3 A ).
3.3 . Charakterizácia kontaminácie MP pozadia (procedurálne a laboratórne slepé vzorky)
Ak vezmeme do úvahy všetky slepé vzorky, stredná zistená miera kontaminácie MP pozadia bola 0,53 ± 1,07 MP na slepú vzorku. Častice identifikované v rámci „procedurálnych slepých vzoriek“ mali priemernú mieru kontaminácie MP 2,00 ± 2,83 MP na vzorku (rozsah 0 – 4) pre šaržu 1, pričom na jednom filtri boli identifikované štyri MP: PE, PE/PP, PS a a častica živice. Na druhom filtri pre dávku 1 neboli zistené žiadne MP (tabuľka S1). Žiadne častice neboli identifikované v rámci „procedurálnych slepých vzoriek“ zo série 2 vzoriek tkaniva na žiadnom z dvoch procedurálnych slepých filtrov (tabuľka S1). Častice zistené z „laboratórnych slepých vzoriek“ (n = 13) mali celkovú priemernú mieru kontaminácie MP 0,38 ± 0,65 MP na vzorku (rozsah 0–2). To zahŕňalo jednu PET, PP, PS, PTFE a PVA časticu z 13 laboratórnych kontrolných filtrov (tabuľka S1). Priemerná dĺžka MP zistená v rámci kombinovaných slepých vzoriek bola 105,22 ± 92,82 μm (rozsah 23–315 μm) a priemerná šírka 34,44 ± 22,61 μm (rozsah 15–73 μm). Tvary MP identifikovaných v kombinovaných slepých vzorkách boli buď fragment (6, 67 %), vlákno (2, 22 %) alebo film (1, 11 %).
Okrem častíc MP boli na vzorkových filtroch detegované častice „prírodného polyméru“ bez MP. Kombináciou procedurálnych a laboratórnych výsledkov bez MP sa zistilo 9,04 ± 4,84 non-MP častíc na vzorku, ktoré pozostávali z celulózy a zeínu.
3.4 . Úpravy kontaminácie MP pozadia
Použitím úprav na zohľadnenie zistených kombinovaných procedurálnych a slepých hladín kontaminácie sa zníži hladina MP identifikovaných vo vzorkách tkaniva v závislosti od použitého prístupu ( tabuľka 1 ). Po úpravách slepého odčítania majú celkové MP identifikované vo vzorkách tkaniva priemer 0,69 ± 0,84 MP/g tkaniva. Odčítaním upravené hladiny MP v ľudských pľúcnych tkanivách boli štatisticky významné v porovnaní so slepými údajmi (Mann-Whitney U test, s .= 0,043). Iba jedna vzorka pľúcneho tkaniva (vzorka 1.1) vyhovovala kritériám na použitie výpočtu LOD a LOQ, pričom vykazovala 1,94 MP/g nad prahom kvantifikácie. Typ polyméru zistený nad touto prahovou hodnotou bol PP. MPs nad LOD, ktoré možno detegovať vo vzorkách pľúcneho tkaniva, ale nekvantifikovať, boli PE, PET, PP, PTFE a živica.
3.5 . Distribúcia MP v ľudských vzorkách podľa oblasti pľúc
MP boli identifikované vo všetkých oblastiach pľúc ( obr. 4 a tabuľka S2). Neupravený priemer 0,80 ± 0,96 MP/g bol identifikovaný v hornej oblasti (upravený na 0,23 ± 0,28 MP/g po odčítaní pozadia), 0,41 ± 0,37 MP/g v strednej/lingulálnej oblasti (upravený na 0,33 ± 0,37 MP/ g) a 3,12 ± 1,30 MP/g v dolnej oblasti (upravené na 1,65 ± 0,88 MP/g). Údaje neboli normálne rozdelené ( p = 0,013) a Kruskal-Wallisov test ukázal, že počet MP v dolnej oblasti bol významne vyšší ako v strednej/lingulárnej ( p = 0,038) a hornej oblasti ( p= 0,026). V hornej oblasti (n = 6, celková hmotnosť = 33,66 g) bolo identifikovaných 11 MP; PE (2, 18 %), PET (2, 18 %), PP (2, 18 %), PES (1, 9 %), PS (1, 9 %), živica (1, 9 %), SEBS ( 1,9 %), TPE (1,9 %). V strednej/lingulárnej oblasti (n = 3, celková hmotnosť tkaniva = 12,19 g) sa identifikovalo 7 MP; PET (2, 29 %), živica (2, 29 %), PE (1, 14 %), PMMA (1, 14 %), PUR (1, 14 %). V dolnej oblasti (n = 4, celková hmotnosť tkaniva = 9,56 g) bolo identifikovaných 21 MP; PP (7, 33 %), PTFE (4, 19 %), PET (3, 14 %), živica (3, 14 %), PS (2, 10 %), PAN (1, 5 %), PE ( 1, 5 %) ( obr. 4 ).
3.6 . Distribúcia MP v ľudskom pľúcnom tkanive u jednotlivých pacientov
MP boli identifikované v 9 z 11 vzoriek pľúc pacientov. Od pacienta 1 sa odobrali viaceré vzorky; 8 MP vo vzorke 1.1 a 2 MP vo vzorke 1.2 ( obr. 5 A ). PP častice boli identifikované v oboch vzorkách ( obr. 5 B). Od pacienta 2 sa tiež odobrali viaceré vzorky; 3 MP vo vzorke 2.1 a 3 MP vo vzorke 2.2. Častice PTFE boli identifikované v oboch vzorkách, zatiaľ čo viaceré polyméry boli identifikované iba v rámci jednej vzorky pacienta ( obr. 5 B).
4 . Diskusia
Táto správa poskytuje presvedčivé dôkazy o MP vo vzorkách ľudského pľúcneho tkaniva pomocou robustného režimu kontaminácie pozadia podľa osvedčených postupov v kombinácii s analýzou chemického zloženia μFTIR na overenie prítomných častíc. Štúdia tiež zdôrazňuje dôležitosť zahrnutia a hodnotenia úprav kontaminácie v rámci výskumu MP a zároveň poskytuje vysokú úroveň zabezpečenia a kontroly kvality.
Celkovo bolo identifikovaných 39 MP v 11 z 13 vzoriek pľúcneho tkaniva, s neupraveným priemerom 1,42 ± 1,50 MP/g tkaniva. Odčítaním všetkých MP detegovaných v zodpovedajúcich slepých vzorkách sa uvádza upravený priemer 0,69 ± 0,84 MP/g vzorky tkaniva. Hladiny MP vo vzorkách tkaniva boli významne vyššie ako hladiny identifikované v kombinovaných procedurálnych/laboratórnych slepých pokusoch. Z zistených MP bolo identifikovaných 12 typov polymérov s najrozšírenejším PP (23 %), PET (18 %), živicou (15 %) a PE (10 %). Je potrebné poznamenať, že spektrá FTIR pre PET a PES (polyester) sú podobné a môže byť ťažké ich rozlíšiť ( Primpke et al., 2018 ; Veerasingam et al., 2021 ), avšak na rozlíšenie bola akceptovaná vysoká zhoda 70 %. medzi typmi MP v rámci tejto štúdie.
MP boli identifikované vo všetkých oblastiach pľúc kategorizovaných ako horná (0,80 ± 0,96 MP/g), stredná/lingulárna (0,41 ± 0,37 MP/g) a dolná (3,12 ± 1,30 MP/g) oblasť. Keď sa však použil prístup LOD a LOQ, kritériám vyhovovala iba jedna vzorka tkaniva, pričom nad prahovými hladinami bol detegovaný iba PP pri 1,94 MP/g ( tabuľka 1 ). Je možné, že väčšina identifikovaných MP bola kontaminovaná, avšak LOD LOQ by tiež mohli „maskovať“ legitímne identifikovaných MP. Prístup úpravy LOD LOQ dramaticky znížil hladinu kvantifikovateľných MP identifikovaných vo vzorkách pľúcneho tkaniva. Toto opatrenie na kontrolu kvality má výhodu v tom, že poskytuje prah nad prahom jednoduchého odčítania , čo umožňuje spoľahlivú detekciu a kvantifikáciu MP ( Brander a kol., 2020). Hoci ide o novovznikajúcu techniku v oblasti MP, má potenciál zohľadniť typ polyméru, ako aj množstvo a bežne sa používa v analytickej chémii. Avšak vzorky obsahujúce nízky počet MP, ako sú tu uvedené vzorky ľudského pľúcneho tkaniva, majú bežne vo vzorke identifikovanú iba jednu MP časticu na typ polyméru. Uvádza sa, že pri riešení takýchto nízkych množstiev MP vo vzorkách bude mať technika LOD LOQ významnejšie účinky a povedie k „zníženej kapacite hlásiť akékoľvek MP nad LOD alebo LOQ“ ( Horton et al., 2021 ). Naše výsledky preto uvádzame tromi spôsobmi; neupravené, upravené odčítaním a upravené LOD LOQ, ale zdôrazňujú dôležitosť techniky LOD LOQ pre budúce štúdie, v ktorých množstvo MP nie je také nízke.
MP boli doteraz detegované v ľudských vzorkách z histologických vzoriek rakoviny pľúc ( Pauly et al., 1998 ) a mŕtvych tiel ( Amato-Lourenço et al., 2021 ), ako aj z ľudskej placenty ( Ragusa et al., 2021 ) . . Naše zistenia sú v súlade s ranou štúdiou Paulyho et al. (1998) pomocou mikroskopie pod polarizovaným svetlom na identifikáciu vlákien (hoci bez overenia chemickej charakterizácie alebo prísnych opatrení na kontrolu kontaminácie), pričom uvádzajú prítomnosť vlákien v 83 % nenádorových vzoriek pľúc (n = 67/81) a v 97 % malígnych vzoriek pľúc (n = 32/33) ( Pauly a kol., 1998). Táto štúdia tiež uvádza, že vlákna boli distribuované vo všetkých oblastiach pľúc a neboli obmedzené na veľké vzduchové priestory ( Pauly et al., 1998 ). Aj keď v tejto skorej štúdii nie je uvedený žiadny formálny rozsah veľkosti, uviedli heterogenitu, pokiaľ ide o dĺžku vlákna, šírku, morfológiu povrchu a farbu, s dĺžkou > 250 μm a šírkou ~ 50 μm ( Pauly et al., 1998 ). Naše zistenia sú tiež v súlade s nedávnou publikáciou Amato-Lourenca et al. ktorí tiež zistili, že PP patrí medzi najrozšírenejšie identifikované plasty ( Amato-Lourenço et al., 2021 ). Na rozdiel od našej štúdie Amato-Lourenco et al.ukázali, že nevláknité častice boli najhojnejším typom MP s veľkosťami menšími ako tie, ktoré sme videli v našej štúdii. Čiastočne by to mohlo byť spôsobené rozdielnou expozíciou MP, naším osvedčeným postupom používaným na elimináciu kontaminácie pozadia alebo metódami používanými na detekciu a charakterizáciu vzoriek, Raman vs. μFTIR. Hoci Ramanova spektroskopia má výhodu nižšieho limitu detekcie metódy (~1 μm), čo by mohlo vysvetliť množstvo menších častíc identifikovaných v štúdii Amato-Lourenco ( Amato-Lourenço et al., 2021 ), môže byť výrazne ovplyvnená fluorescenciou. interferenciu a nedeteguje rovnaké polárne píky ako μFTIR spektroskopiamôcť. Okrem toho môže Ramanova spektroskopia UV degradovať analyzované častice, čo by mohlo brániť potenciálnemu budúcemu vyšetrovaniu. Hoci sa teda obe spektroskopické techniky navzájom dopĺňajú, μFTIR má určité výhody, ktoré sú prínosom pre výskum MP ( Silva et al., 2018 ).
Je zaujímavé, že tkanivo od mužských darcov obsahovalo významne vyššie hladiny neupraveného MP (2,09 ± 1,54 MP/g) v porovnaní so ženami (0,36 ± 0,50 MP/g), pričom všetky vzorky od mužov obsahovali MP, ale dve z piatich vzoriek od žien nevykazovali žiadne poslancov. Predpokladáme, že je to spôsobené tým, že ženské dýchacie cesty sú výrazne menšie ako dýchacie cesty mužov ( Dominelli et al., 2018 ), hoci relatívne malá veľkosť vzorky, ktorá sa tu používa, diktuje vykonať viac analýz na ďalšie preskúmanie takýchto rozdielov.
Podľa Donaldsona a kol. (1993), len častice s fyzikálnym priemerom menším ako 3 μm môžu vstúpiť do alveolárnej oblasti pľúc ( Donaldson et al., 1993 ). V literatúre sa uvádza, že alveolárny kanálik má priemer ~540 μm a dĺžku 1410 μm ( Horsfield et al., 1971 ). V tejto štúdii boli vo vzorkách pľúc detegované častice s veľkosťou od 12 do 2475 μm na dĺžku a 4–88 μm na šírku, teoreticky príliš veľké na to, aby boli prítomné, no napriek tomu prítomné.
Zatiaľ čo osud častíc vstupujúcich do pľúc a ich výsledné biologické účinky, pokiaľ ide o zápalové reakcie, sú dobre známe pre ultrajemné častice v rozsahu veľkosti NP alebo PM 10 ( Oberdörster a kol., 1994 ; Kreyling a kol., 2006 ), zodpovedajúce informácie sú v súčasnosti nedostupné pre rozsah veľkostí MP tu pozorovaných častíc, čo poukazuje na vážnu medzeru v znalostiach. Existujú obmedzené nedávne štúdie, ktoré dokazujú veľkosti častíc a ukladanie v pľúcach. Je možné, že môže existovať vopred vytvorený predpoklad o veľkostiach častíc, ktoré sú vdýchnuteľné a schopné dostať sa do dolných dýchacích ciest, ale v tejto štúdii a iných ( Pauly a kol., 1998 ; Amato-Lourenço a kol. , 2021) sú hlásené častice väčšie ako tieto, a preto môže byť čas prehodnotiť tieto čísla a preskúmať, aké veľkosti je možné vdýchnuť. Je zaujímavé, že aj po aplikácii LOD a LOQ bol PP identifikovaný vo vzorke 1.1 nad limitom veľkosti, ktorý sa vo všeobecnosti považuje za inhalovateľný.
12 MP ≤10 μm bolo identifikovaných v 7 z 13 vzoriek pľúcneho tkaniva, ktoré pozostávali z PET (3), živice (3), PE (2), PP (2), PTFE (1) a PAN (1) ( tabuľka 1 ). Najmenšia identifikovaná častica mala dĺžku 14 μm a šírku 4 μm ( obr. 2 C) a bola identifikovaná ako „alkydová živica“, syntetický termoplast používaný v ochranných náteroch a farbách ( Databáza vlastností polymérov, nd ). V rámci slepých pokusov sa nezistili žiadne MP ≤ 10 μm, čo je prekvapujúce, pretože je známe, že prevalencia MP v prostredí sa zvyšuje s klesajúcou veľkosťou častíc ( Allen a kol., 2019 ; Dris a kol., 2017 ; Cai a kol., 2017), čo naznačuje, že prijaté opatrenia na zabezpečenie kvality odstránili tieto menšie častice z polotovarov. Pretože tieto malé MP trvalo chýbali na slepých pokusoch ( obr. 3 B), poukazuje to na pravdepodobnosť, že menšie MP sú prítomné v pľúcnom tkanive a nie zo zdrojov kontaminácie pozadia.
Všadeprítomnosť MP v prostredí má za následok kontamináciu pozadia v akejkoľvek štúdii, dokonca aj po aplikovaní prísnych opatrení na kontrolu kvality. Slepé vzorky alebo kontroly sa vykonávajú spolu s analýzou vzoriek, aby sa zdokumentovali úrovne a typy MP kontaminujúcich vzorky, a to buď napodobením krokov spracovania vzorky („procedurálny slepý pokus“), alebo otvorením čistého filtra počas analýzy vzorky („laboratórny slepý pokus“). . Zriedkavo sa používajú procedurálne aj laboratórne slepé pokusy ( Brander a kol., 2020). V návrhu tejto štúdie sa predpokladalo, že ak by boli MP prítomné vo vzorkách pľúcneho tkaniva, boli by prítomné v nízkych hladinách, najmä vzhľadom na detekčný limit chemickej verifikácie. Preto je zdôraznená dôležitosť kombinovania viacerých procedurálnych a laboratórnych slepých vzoriek. V tejto štúdii boli MP charakteristiky identifikované v rámci slepých pokusov odlišné od charakteristík identifikovaných vo vzorkách pľúcneho tkaniva; hlavné množstvo polyméru, rozsah veľkostí a tvar sa menili ( obr. 3A, B). Vzorky ľudského pľúcneho tkaniva typicky pozostávali z PP, PET a živice s dĺžkami v rozmedzí od 12 do 2475 μm a šírkami od 4 do 88 μm a vlákna boli rozšírenejšie ako fragmenty. Na rozdiel od toho MP detegované v slepých vzorkách boli menej hojné a mali odlišné vlastnosti častíc. MPs mali veľkosť 23–315 μm a 15–73 μm na dĺžku a šírku a fragmenty boli častejšie ako vlákna.
V literatúre o MP nebola stanovená štandardizovaná technika úpravy kontaminácie. Preto sa táto štúdia rozhodla uvádzať koncentrácie tromi bežne používanými spôsobmi; podrobne uvádzajú výsledky slepých pokusov, ale nevykonávajú žiadne úpravy ( Zhang et al., 2020 ; Liu et al., 2019b ), úpravy odčítania ( Allen et al., 2019 ; Gaston et al., 2020 ) a úpravy LOD LOQ ( Jenner et al., 2021 ; Horton a kol., 2021). Bez úprav kontaminácie sa pozorovalo 1,42 ± 1,50 MP/g pľúcneho tkaniva. Aj keď je táto metóda bežnou praxou, pravdepodobne zahŕňa akúkoľvek kontamináciu vo vzorkách. Úprava odčítaním znižuje konečnú strednú hodnotu MP pľúcneho tkaniva na 0,69 ± 0,84 MP/g a zohľadňuje akúkoľvek potenciálnu kontamináciu pozadia, ale nie je špecifická, pokiaľ ide o charakteristiky častíc. Prístup úpravy LOD LOQ dramaticky znižuje hladiny MP identifikované v rámci štúdie na 0,15 ± 0,54 MP/g pomocou prístupu špecifického pre polymér, ale možno vidieť, že „maskuje“ nízke hladiny MP. V konečnom dôsledku táto štúdia zdôrazňuje potrebu úprav údajov, aby sa zohľadnila kontaminácia pozadia, ale spolu s hodnotením, ktorá úprava je najlepším prístupom. Bez ohľadu na úpravy,
Vzdušné MP sú celosvetovo všadeprítomné a prevládajú najmä v interiéroch, kde ľudia trávia veľa hodín denne, ako napríklad doma ( Dris a kol., 2017 ; Jenner a kol., 2021 ; Vianello a kol., 2019 ; Zhang a kol., 2020 ) . a úrad ( Dris a kol., 2017 ; Zhang a kol., 2020 ). Ľudia sú tak nepretržite vystavení atmosférickým MP, pričom odhady inhalácie sa pohybujú od 6 do 272 MP/deň ( Vianello a kol., 2019 ; Prata, 2018 ; Domenech a Marcos, 2021). Sú to najmenšie a najmenej husté častice MP a NP, ktoré sú najväčším dôvodom na obavy týkajúce sa zdravia dýchacích ciest, pretože tieto MP sa s najväčšou pravdepodobnosťou ukladajú v pľúcach na základe aerodynamického priemeru ( Prata, 2018 ). Na rozdiel od NP sa častice MP v celom rozsahu mikroveľkostí (10 μm – 5 mm) ešte musia zvážiť z hľadiska zdravotných dôsledkov a potenciálnych vplyvov, pričom možno neboli prioritou v porovnaní s menšími ultrajemnými časticami. Tu uvedené výsledky naznačujú, že väčší rozsah mikroveľkosti sa deteguje vo vzorkách ľudských pľúc, čo naznačuje, že tieto boli prehliadnuté (ako príliš veľké na to, aby sa dostali do pľúc). MP, ako všetky makroplasty, sú navrhnuté tak, aby boli odolné, s pridaním farbív a prísad, ktoré určujú ich vlastnosti ( GESAMP, 2015). Už skôr sa predpokladalo, že inhalované MP pravdepodobne biopretrvávajú a možno sa akumulujú v prostredí pľúc ( Wright a Kelly, 2017 ), čo ukazuje odolnosť voči degradácii syntetickou extracelulárnou pľúcnou tekutinou po 180 dňoch ( Law et al., 1990 ). Po usadzovaní v pľúcach sú mechanizmy toxicity neznáme, ale vlastnosti častíc, ako je malá veľkosť, hustota, koncentrácia, tvar, typ monoméru , chemické výluhy a environmentálne adsorbenty ( napr . baktérie, ťažké kovy a polyaromatické uhľovodíky), všetky boli navrhnuté ako potenciálni prispievatelia. k cytotoxicite ( Prata, 2018 ; Wright a Kelly, 2017 ). Zápal ( Porter a kol., 1999), ROS a oxidačný stres ( Schirinzi et al., 2017 ), fyzické poškodenie v dôsledku tvaru častíc, frustrovaná fagocytóza ( Donaldson et al., 1993 ), sú v súčasnosti navrhované bunkové reakcie na vystavenie MP.
Stručne povedané, táto štúdia je prvá, ktorá uvádza MP vo vzorkách ľudského pľúcneho tkaniva pomocou μFTIR spektroskopie. Množstvo MP vo vzorkách, výrazne vyššie ako v slepých vzorkách, podporuje inhaláciu človeka ako spôsob vystavenia sa životnému prostrediu. MPs s rozmermi len 4 μm, ale prekvapivo aj > 2 mm, boli identifikované vo všetkých vzorkách pľúcnych oblastí, pričom väčšina bola vláknitá a fragmentovaná. Poznatky, že MP sú prítomné v ľudských pľúcnych tkanivách, môžu teraz nasmerovať budúci výskum cytotoxicity na preskúmanie akýchkoľvek zdravotných dôsledkov spojených s inhaláciou MP.
vyhlásenie o autorskom príspevku CRediT
Lauren C. Jenner: Konceptualizácia, skúmanie, metodológia, formálna analýza, písanie – pôvodný návrh, písanie – kontrola a úprava, vizualizácia. Jeanette M. Rotchell: Konceptualizácia, formálna analýza, písanie – pôvodný návrh, písanie – kontrola a úprava, supervízia. Robert T. Bennett: Zdroje, písanie – recenzia a úprava. Michael Cowen: Zdroje, písanie – recenzia a úprava. Vasileios Tentzeris: Zdroje, písanie – recenzie a úpravy. Laura R. Sadofsky: Konceptualizácia, formálna analýza, písanie – pôvodný návrh, písanie – kontrola a úprava, supervízia.
Vyhlásenie konkurenčného záujmu
Autori vyhlasujú, že nemajú žiadne známe konkurenčné finančné záujmy alebo osobné vzťahy, ktoré by mohli ovplyvniť prácu uvádzanú v tomto dokumente.
Poďakovanie
Tento výskum nezískal žiadny konkrétny grant od financujúcich agentúr vo verejnom, komerčnom alebo neziskovom sektore. Bolo financované z štipendia PhD v klastri „Human Health and Emerging Environmental Contaminants“ financovaného Univerzitou v Hull.
Príloha A. Doplňujúce údaje
Klikni na modré: Na stiahnutie:PDF
Zdroj: www.sciencedirect.com
Ďalšie články: https://www.dostojneslovensko.eu/sk/informacie-o-kovide-a-pravne-dokumenty/informacie-o-ruskach
A nezabúdajte, že ešte minulá vláda schválila povinnosť rúška v interiéroch. Táto vláda v tom pokračovala a k tomu ešte celý parlament na jar 2021 podporil respirátory. Doslovne celý parlament....všetci poslanci NR SR!!!
Na rozdiel od mnohých iných nemá Oz Dôstojnosť Slovenska žiadnych akcionárov ani miliardárskeho vlastníka. Len odhodlanie a vášeň poskytovať nielen vysoko účinné globálne spravodajstvo, vždy bez komerčného alebo politického vplyvu. Takéto podávanie správ je životne dôležité pre demokraciu, spravodlivosť a požiadavku na lepšie od mocných.
A to všetko poskytujeme zadarmo, aby si to mohol prečítať každý. Robíme to preto, lebo veríme v informačnú rovnosť. Väčšie množstvo ľudí môže sledovať globálne udalosti, ktoré formujú náš svet, pochopiť ich vplyv na ľudí a komunity a inšpirovať sa k zmysluplným krokom. Milióny ľudí môžu ťažiť z otvoreného prístupu ku kvalitným a pravdivým správam bez ohľadu na ich schopnosť zaplatiť za ne.
Podporte nás: Bez vašej pomoci by sme toto nedokázali.
Neziskový sektor: SLSP
Názov účtu: Dôstojnosť Slovenska
SK28 0900 0000 0051 7971 8989
Všetky práva vyhradené ® OZ Dôstojnosť Slovenska. Zdieľanie dovolené.